二氧化碳培养箱操作规程
发布时间:2025-01-23 15:53:57 来源 : 作者: 点击:
一、操作前准备
(一)仪器检查
- 检查培养箱外观是否有损坏,包括箱体、门、控制面板等部件,确保无明显划痕、变形或破损。
- 查看电源插头及电源线是否完好无损,连接是否牢固。打开培养箱门,检查内部照明是否正常亮起,箱内风扇是否能正常运转。
- 检查二氧化碳进气管道连接是否紧密,无松动或漏气现象。同时确认二氧化碳钢瓶内有足够的气体供应,阀门开启灵活。
- 检查水盘(如果有),水盘应清洁无污垢,加入适量的无菌蒸馏水,水位应保持在合适的标记范围内,以维持箱内湿度。
(二)参数设置
- 接通培养箱电源,打开电源开关。等待数分钟,让仪器进行自检和初始化。
- 在控制面板上设置温度参数。一般细胞培养的温度设置为 37℃,根据具体实验要求,可在一定范围内微调,调节精度通常为±0.1℃。
- 设置二氧化碳浓度参数。通常细胞培养所需的二氧化碳浓度为 5%,同样可根据实验需求在一定范围内调整,调节精度一般为±0.1%。
- 设置湿度参数(部分培养箱可设置)。一般保持相对湿度在 95%左右,以满足细胞生长的环境要求。
(三)消毒与预热
- 为避免污染,在使用前应对培养箱内部进行消毒处理。可使用 75%酒精擦拭培养箱内壁、搁板及水盘等部件,然后用无菌蒸馏水冲洗干净,并开启紫外灯照射 30 分钟以上进行杀菌。
- 完成消毒后,关闭紫外灯,将培养箱门关闭,开启培养箱进行预热。使箱内温度和二氧化碳浓度达到并稳定在设置的参数值,这个过程通常需要数小时至半天时间,具体时间根据培养箱的性能而定。
二、操作步骤
(一)样品放入
- 当培养箱内的温度、二氧化碳浓度和湿度达到设定值并稳定后,可将需要培养的样品放入培养箱。
- 打开培养箱门时,动作要轻缓,尽量减少外界空气进入箱内。将装有细胞或组织的培养器皿(如培养瓶、培养皿等)整齐地放置在培养箱的搁板上,注意不要堵塞风扇出风口和回风口,以保证箱内空气循环良好。
- 关闭培养箱门,确保门密封良好,防止箱内气体泄漏和外界空气进入。
(二)培养过程监控
- 在培养过程中,定期观察培养箱的运行状态。通过控制面板查看温度、二氧化碳浓度和湿度等参数是否保持在设定范围内。
- 每天检查培养箱内部的情况,观察培养器皿中的培养液是否有蒸发、变色等异常现象,如有异常,需及时处理。
- 定期记录培养箱的运行参数,包括温度、二氧化碳浓度、湿度以及开启时间、样品放入时间等信息,以便追溯和分析培养过程。
(三)样品取出
- 根据实验要求,当培养时间达到预定值后,准备取出培养样品。
- 打开培养箱门,小心地取出培养器皿。注意避免碰撞培养器皿,防止样品受到污染或损坏。
- 关闭培养箱门,继续保持培养箱的运行状态,以便下次使用。如果短期内不再使用,可将培养箱内的水盘取出,倒掉剩余的水,然后关闭电源。
三、操作后处理
(一)培养箱清洁
- 培养结束后,及时清理培养箱内部。取出培养箱内的搁板和水盘,用清水冲洗干净,然后用 75%酒精擦拭消毒,晾干后放回培养箱。
- 用湿布擦拭培养箱内壁,去除可能残留的培养液、污渍等。若有顽固污渍,可使用温和的清洁剂进行擦拭,但要注意避免对培养箱造成腐蚀。
- 清洁完成后,可再次开启紫外灯照射 30 分钟以上,对培养箱进行消毒,为下一次使用做好准备。
(二)仪器维护
- 定期(一般每 3 - 6 个月)对培养箱进行全面维护保养。检查温度传感器、二氧化碳传感器的准确性,如有偏差,需进行校准。
- 检查培养箱的密封性能,确保箱门关闭后无气体泄漏。如有必要,更换密封胶条。
- 定期检查二氧化碳进气管道和过滤器,如有堵塞或损坏,及时清理或更换。
- 按照仪器说明书的要求,定期对培养箱的其他部件进行检查和维护,确保仪器始终处于良好的运行状态。
四、注意事项
- 培养箱应放置在平稳、干燥、通风良好的地方,避免阳光直射和靠近热源、水源。
- 在操作过程中,要严格遵守无菌操作原则,防止培养样品受到污染。进入培养箱的物品应经过严格的消毒处理。
- 不要随意更改培养箱的参数设置,如需调整,应在专业人员的指导下进行。
- 如培养箱在运行过程中出现报警信号,应立即查看报警原因,并按照仪器说明书的提示进行处理。若无法解决问题,应及时联系专业维修人员。
- 定期更换二氧化碳钢瓶,确保培养箱内有稳定的二氧化碳供应。在更换钢瓶时,要注意操作规范,防止气体泄漏。
- 严禁在培养箱内放置易燃易爆物品,以免发生安全事故。