核酸扩增检测分析仪操作规程
发布时间：2025-01-24 13:34:15   来源 :    作者：   点击：

一、操作前准备

（一）仪器检查

1. 检查核酸扩增检测分析仪的外观，确保仪器表面无损坏、无污渍。查看仪器的显示屏、按键等是否正常。
2. 确认仪器的电源连接正确，接通电源后，打开仪器开关，观察仪器的自检过程。自检通过后，检查仪器的温度控制、荧光检测等功能是否正常，各项参数显示是否准确。

（二）试剂准备

1. 根据检测项目，准备相应的核酸扩增检测试剂盒。检查试剂盒的有效期，查看试剂盒内的试剂是否齐全，有无变质、漏液等情况。
2. 按照试剂盒说明书的要求，将试剂进行适当的复温（如果需要），并进行试剂的配制和分装等操作。注意在操作过程中要严格遵守无菌操作原则，避免试剂污染。

（三）样本准备

1. 采集患者的样本，如血液、痰液、咽拭子等，确保样本采集的量和质量符合检测要求。样本采集后，应尽快进行处理和检测，如需保存，要按照规定的条件进行保存。
2. 对采集的样本进行核酸提取。使用合适的核酸提取试剂盒和方法，按照操作规程提取样本中的核酸。提取后的核酸样本应妥善保存，避免核酸降解。

（四）耗材准备

准备好与仪器配套的反应管、封板膜（如果是 96 孔板检测）、移液器吸头、一次性手套、防护衣等耗材。确保耗材的质量和规格符合仪器的使用要求，且在有效期内。

二、操作步骤

（一）加样

1. 在无菌操作环境下，将提取好的核酸样本、反应试剂等按照试剂盒说明书的要求加入到相应的反应管或 96 孔板中。加样过程中要注意准确吸取和加样，避免交叉污染。使用移液器时，要选择合适的量程，并按照正确的操作方法进行加样。
2. 加样完成后，轻轻混匀反应体系，可以通过轻轻振荡或涡旋的方式，但要注意避免产生过多气泡。然后用封板膜（如果是 96 孔板）密封反应管或 96 孔板，防止反应过程中液体蒸发和污染。

（二）上机检测

1. 打开仪器的样本舱门，将加好样的反应管或 96 孔板放入仪器的样本槽中，注意放置的位置要正确，确保仪器能够准确识别和检测样本。
2. 根据检测项目和试剂盒的要求，在仪器的操作界面上设置相应的检测参数，如扩增程序（包括变性温度、退火温度、延伸温度及时间等）、荧光检测通道等。设置完成后，仔细核对参数是否正确。
3. 参数确认无误后，启动仪器的检测程序。仪器开始运行，进行核酸扩增和荧光信号的检测。在检测过程中，不要随意打开仪器的样本舱门，以免影响检测结果。

（三）结果分析

1. 检测结束后，仪器会自动采集和分析荧光信号数据，并生成检测结果。在仪器的操作界面上查看检测结果，结果通常以 Ct 值（循环阈值）、阴阳性判定等形式显示。
2. 根据试剂盒的说明书和实验室制定的标准，对检测结果进行判读。一般来说，Ct 值小于设定的临界值为阳性结果，表明样本中存在目标核酸；Ct 值大于临界值或无 Ct 值出现为阴性结果。如果结果出现异常，如 Ct 值处于临界范围或出现可疑信号，需要进一步分析和处理，可能需要重新检测样本。

三、操作后处理

（一）样本处理

检测完成后，将反应管或 96 孔板从仪器中取出。按照生物安全的要求，对样本和反应废弃物进行妥善处理。一般采用高压灭菌或化学消毒等方法进行无害化处理，然后按照医疗废物的处理规定进行丢弃。

（二）仪器清洁

1. 用干净的湿布擦拭仪器的样本舱内部和外部表面，清除可能残留的液体和污渍。注意不要让水进入仪器的内部电子元件。
2. 如果在检测过程中有液体泄漏到仪器内部，应立即关闭仪器电源，按照仪器的清洁维护手册进行处理，必要时联系仪器厂家的技术支持人员。

（三）数据保存与记录

1. 将检测结果数据进行保存，可以通过仪器自带的数据存储功能或导出到外部存储设备（如 U 盘）中。保存的数据应包括患者信息、检测项目、检测结果、检测时间等详细内容，以便后续查询和统计分析。
2. 详细记录仪器的使用情况，包括仪器的开机时间、关机时间、检测项目、样本数量、仪器运行是否正常等信息。同时，记录试剂的使用情况和样本的来源等信息，便于追溯和管理。